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Addgene教您如何保存和使用質粒?

常見問題&FAQ

Addgene是如何制備穿刺菌的?

收到Addgene質粒后,您應該怎么處理?

Addgene推薦的細菌保存方法?

下面這個視頻中就這些問題做了詳細的說明。如果感興趣,趕快點擊視頻學習吧!別忘記了把好東西分享哦!

 

 

穿刺菌的制備

 

Addgene質粒以穿刺菌的形式運輸。Addgene的技術人員會在裝有甘油菌的小管上打上二維的條形碼,每個穿刺菌對應一個單獨條形碼,以保證質粒被正確運輸。

Addgene技術人員用無菌牙簽取一些庫存細菌,然后接種形成穿刺菌。穿刺接種的細菌在溫箱中孵育過夜(每個質粒的生長溫度信息可以在Addgene官網上查詢),并在第二天上午檢查其是否生長,技術員應該在制備的穿刺菌表面上能看到細菌。條形碼在包裝時要再次掃描以確保科學家收到正確的質粒樣品。

 

質粒培養方法

您收到穿刺菌后,應該在4攝氏度冰箱中存放您的質粒樣品。并在兩周內,在含有相應抗生素(每個質粒的抗生素信息可以在Addgene官網上查詢)的瓊脂平板上劃線培養出單菌落。然后從一個單菌落中挑取細菌,接種到液體培養基中,依據Addgene網站上質粒的生長條件進行過夜培養。

 

保存細菌時,需要將300 ul細菌的液體培養物和300 ul 50%的甘油按照1:1比例混合制成甘油菌,儲存在-80攝氏度冰箱中。甘油菌通常是長期存儲質粒的一個好方法。此外,您可以使用細菌培養物提取質粒以備以后使用或存放。

 

更多信息,可以訪問Addgene網站上的相關內容。

 

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